Официален вестник L 179, 09/07/2002 стр. 0013 - 0018
Регламент (ЕО) на Комисията 1226/2002
за изменение на приложение Б към Директива 64/432/ЕИО на Съвета
КОМИСИЯ НА ЕВРОПЕЙСКИТЕ ОБЩНОСТИ,
Като взе предвид Договора за създаване на Европейската общност,
Като взе предвид Директива 64/432/ЕИО на Съвета [1] от 26 юни 1964 г. относно здравословните проблеми на животните, засягащи търговията с едър рогат добитък и свине в Общността, последно изменена с Регламент (ЕО) № 1774/2002 на Комисията. 535/2002 [2], и по-специално член 16, параграф 2, втора алинея от него, 1,
(1) На 11 октомври 1999 г. Научният комитет по здравето на животните и хуманното отношение към животните одобри доклад [3] за промяната на техническите приложения към Директива 64/432/ЕИО на Съвета, за да се вземе предвид научния напредък по отношение на туберкулозата, бруцелозата и ензоотичното говедо левкоза.
(2) В съответствие с горния доклад, тестовете за туберкулоза трябва да се извършват в съответствие с Ръководството за стандарти за диагностични тестове и ваксини, трето издание, 1996 г. на Office International des Epizooties (OIE).
(3) През август 2001 г. OIE издаде четвъртото издание на ръководството от 2000 г., включващо някои модификации по отношение на описанието на туберкулозните тестове.
(4) През януари 2002 г. Европейската дирекция за качество на лекарствата публикува четвъртото издание на Европейската инвентаризация на лекарствените продукти от 2002 г., включително монографии 0535 и 0536 за пречистени протеинови производни на птичи и говежди туберкулин.
(5) Следователно е необходимо да се измени приложение Б към Директива 64/432/ЕИО, за да се определят процедурите за изпитване, приложими за надзор и търговия в Общността, като се вземе предвид становището на Научния ветеринарен комитет.
(6) Мерките, предвидени в настоящия регламент, са в съответствие със становището на Постоянния комитет по хранителната верига и здравето на животните,
ПРИЕ НАСТОЯЩИЯ РЕГЛАМЕНТ:
Приложение Б към Директива 64/432/ЕИО се заменя с приложението към настоящия регламент.
Настоящият регламент влиза в сила на двадесетия ден след публикуването му в Официален вестник на Европейските общности.
Настоящият регламент е задължителен в своята цялост и се прилага пряко във всички държави-членки.
Съставено в Брюксел на 8 юли 2002 г.
[1] Ú. в. 121U 121, 29.7.1964, стр. 1977/64.
[2] Ú. в. LU L 80, 23.3.2002 г., стр. 22.
1. ИДЕНТИФИКАЦИЯ НА АВТОРА
Наличието на Mycobacterium bovis (M. bovis) на говеждия туберкулозен агент в клинични и следкланични проби може да бъде демонстрирано чрез изследване на промени в цвета или техники на имунопероксидаза и потвърдено чрез култивиране на организма в първична изолираща среда.
Патологичният материал за потвърждаване на M. bovis трябва да бъде взет от прекомерни (анормални) лимфни възли и паренхимни органи като белите дробове, черния дроб, далака и др. В случаите, когато животните не показват патологични лезии, проби от ретрофарингеални, бронхиални, медиастинални, супрамамарни, долночелюстни и някои мезентериални лимфни възли и черен дроб трябва да се вземат за изследване и култивиране.
Идентифицирането на изолатите обикновено може да се извърши чрез определяне на културата и биохимичните свойства. Полимеразната верижна реакция (PCR) също може да се използва за откриване на комплекс M. tuberculosis. Техниките за ДНК анализ могат да се окажат по-бързи и по-надеждни от биохимичните методи за разграничаване на M. bovis от другите членове на комплекса M. tuberculosis. Генетичните пръстови отпечатъци позволяват да се прави разлика между различни щамове на M. bovis и да се описват типични примери за произхода, предаването и разпространението на M. bovis.
Използваните техники и средства, тяхната стандартизация и тълкуване на резултатите трябва да бъдат в съответствие с това, което е посочено в Ръководството на OIE за стандарти за диагностични тестове и ваксини, Четвърто издание, 2000, глава 2.3.3 (туберкулоза по говедата).
2. ИЗПИТВАНЕ НА ТУБЕРКУЛИНОВА КОЖА
За извършване на официалния кожен туберкулинов тест в съответствие с процедурите, посочени в параграф 2.2, се използва туберкулин PPD (пречистени протеинови производни), който отговаря на стандартите, посочени в параграф 2.1.
2.1 2.1. Стандарти за туберкулин (говеда и птици)
Пречистеното протеиново производно на туберкулин (PPD, говежди или птичи) е препарат, получен от термично обработени продукти за растеж и разграждане на Mycobacterium bovis или Mycobacterium avium (което е възможно), способен да открие забавена свръхчувствителност при животно, податливо на микроорганизми от същия вид.
2.1.2 2.1.2. Производство
Получава се от водоразтворими фракции, приготвени чрез нагряване в свободно течаща водна пара и след това филтриране на култури от M. bovis или M. avium (според случая), отглеждани в течна синтетична среда. Активната фракция на филтрата, състояща се предимно от протеин, се изолира чрез утаяване, промиване и повторно разтваряне. Може да се добави антимикробен консервант, който няма да предизвика фалшиво положителни реакции, като напр. фенол. Крайният стерилен препарат, който не съдържа микобактерии, се пренася асептично в стерилни стъклени предпазни контейнери, които след това се затварят, за да се предотврати замърсяването. Препаратът може да бъде лиофилизиран.
2.1.3 Идентификация на продукта
Инжектирайте набор от градуирани дози в кожата на различни места в подходящо чувствителни морски свинчета албиноси, нито едно от които не трябва да тежи по-малко от 250 g. След 24 до 28 часа се появяват реакции под формата на оток на оток с еритем със или без некроза в точките на инжектиране. Мащабът и интензивността на реакциите варират в зависимост от дозата. Нечувствителните морски свинчета не показват отговор на подобни инжекции.
2.1.4.1 рН: рН варира от 6,5 до 7,5.
2.1.4.2 Фенол: Ако препаратът, който ще се изследва, съдържа фенол, неговата концентрация не трябва да надвишава 5 g/l.
2.1.4.3 Сенсибилизиращ ефект: Използвайте група от три морски свинчета, които не са били третирани с материал, който пречи на теста. На три пъти на интервали от пет дни инжектирайте подкожно във всяко морско свинче доза от изследвания продукт, еквивалентна на 500 IU в 0,1 ml. 15 до 21 дни след третата инжекция, инжектирайте същата доза (500 IU) в кожата на тези животни и в контролна група от три морски свинчета със същото тегло, които преди това не са получавали туберкулинови инжекции. 24 до 28 часа след последните инжекции, реакциите на двете групи не се различават значително.
2.1.4.4 Токсичност: Използвайте две морски свинчета, всяко с тегло най-малко 250 g, които не са били предварително обработени с материал, който пречи на теста. Инжектирайте 0,5 ml от продукта, който трябва да се изследва подкожно, във всяко морско свинче. Наблюдавайте животните в продължение на седем дни. По време на периода на наблюдение не се наблюдават необичайни ефекти.
2.1.4.5 Стерилност: Тя е в съответствие с теста за стерилност, предписан в монографията за ваксини за ветеринарна употреба, 4-то издание, 2002 Европейска фармакопея.
Ефикасността на пречистеното производно на туберкулиновия протеин (говежди и птичи) се определя чрез сравняване на отговорите, получени при сенсибилизирани морски свинчета чрез интрадермално инжектиране на серия от разреждания на продукта, който трябва да бъде изследван, с реакции, получени с известни концентрации на пречистеното туберкулиново протеиново производно ( говеда или птици), съображения), калибрирани в международни единици.
Тестът не е валиден, докато очакваните граници на грешки (P = 0,95) не са по-малко от 50% и по-големи от 200% от очакваната ефективност. Очакваната потентност за говежди туберкулин е не по-малка от 66% и не повече от 150% от обявената потентност. Очакваната сила на птичия туберкулин е не по-малка от 75% и не повече от 133% от обявената сила. Декларирана потентност с не по-малко от 20 000 IU/ml за който и да е от тези туберкулини (говежди и птичи).
Да се съхранява при 5 ± 3 ° C и да се пази от светлина.
Етикетът гласи:
- ефективност в международни единици на милилитър,
- името и количеството на всяко добавено вещество,
- в случай на лиофилизирани препарати:
- наименованието и обема на реконструиращата течност, която трябва да се вземе,
- използване на продукта след реконструкция.
2.2 2.2. Процедури за изпитване
2.2.1 Следните са признати за официални интрадермални туберкулинови тестове:
- прост интрадермален тест: този тест изисква еднократно инжектиране на говежди туберкулин,
- сравнителен интрадермален тест: този тест изисква една инжекция говежди туберкулин и една инжекция птичи туберкулин, приложени едновременно.
2.2.2 Дозата на инжектиран туберкулин е:
- най-малко 2000 IU говежди туберкулин,
- най-малко 2000 IU птичи туберкулин.
2.2.3 Обемът на всяка инжектирана инжекция не трябва да надвишава 0,2 ml.
2.2.4.Туберкулиновите тестове се извършват чрез инжектиране на туберкулин (и) в кожата на шията. Точките за инжектиране трябва да бъдат разположени на границата между предната и средната трета на шията. Когато се инжектира в едно и също животно, както птичи, така и говежди туберкулин, мястото за инжектиране на птичи туберкулин е на около 10 см от шийката на шията, а мястото на инжектиране на говежди туберкулин е приблизително 12,5 см по-ниско на линия, успоредна на линията на раменете или на друга страни на врата; в случай на млади животни, където няма място за достатъчно отделяне на местата от едната страна на шията, се прави по една инжекция от всяка страна на шията в същите места в средата на средната трета на врата.
2.2.5 Туберкулиновата техника и интерпретация на реакциите е както следва:
Местата за инжектиране се изрязват и почистват. Кожната гънка на всяка подрязана област се хваща между показалеца и палеца, измерва се с дебеломери и се записва. След това дозата туберкулин се инжектира по такъв начин, че да се осигури интрадермалното разпределение на туберкулина. Може да се използва къса стерилна игла със скосен ръб, обърнат навън, с разделена спринцовка, пълна с туберкулин, пробита косо в по-дълбоките слоеве на кожата. Правилното инжектиране може да се потвърди чрез усещане на малък грахообразен оток от всяка страна на инжекцията. Дебелината на кожната гънка на всяко място на инжектиране се измерва 72 часа (± 4 часа) след инжектирането и се записва.
2.2.5.2 Интерпретация на реакциите
Тълкуването на реакциите се основава на клинични наблюдения и на наблюдаваното увеличение (а) в дебелината на кожната гънка на местата за инжектиране 72 часа след инжектирането на туберкулина (ите).
(a) Нежелана реакция: ако се наблюдава само ограничен оток с увеличаване на дебелината на кожната гънка не повече от 2 mm без клинични признаци като дифузен или обширен оток, излив, некроза, болка или възпаление на лимфните канали в областта или лимфни възли.
б) неубедителна реакция: ако не се наблюдават нито един от клиничните признаци, споменати в буква а), или ако увеличаването на дебелината на кожната гънка е по-голямо от 2 mm и по-малко от 4 mm.
в) Положителна реакция: ако се наблюдават клиничните признаци, посочени в буква а) или ако се наблюдава увеличаване на дебелината на кожната гънка от 4 mm или повече на мястото на инжектиране.
2.2.5.3 Тълкуването на официалните интрадермални туберкулинови тестове е както следва:
2.2.5.3.1. Прост интрадермален тест:
а) положителна: положителна реакция от говеда, както е определена в параграф 2.2.5.2. ° С);
б) неубедителна: неубедителна реакция, както е определена в параграф 2.2.5.2. б);
в) отрицателна: отрицателна реакция от говеда, както е определена в параграф 2.2.5.2. а).
Животните, които не реагират на обикновен интрадермален тест, се подлагат на допълнителен тест след най-малко 42 дни.
Животните, които не реагират отрицателно на този втори тест, се считат за реагирали положително на теста.
Животните, отговорили положително на обикновен интрадермален тест, могат да бъдат подложени на сравнителен интрадермален тест, ако има съмнение за фалшиво положителна реакция или интерференция.
2.2.5.3.2 Сравнителен интрадермален тест за потвърждаване и поддържане на официално свободен от туберкулоза статус на стадото:
а) положителна: положителна реакция от говеда, която е с повече от 4 mm по-голяма от реакцията на птиците, или наличието на клинични признаци;
б) неубедителни: положителна или неубедителна говежда реакция, която е с 1 до 4 mm по-голяма от реакцията на птиците и отсъствието на клинични признаци;
в) отрицателна: отрицателна реакция на говедата или положителна или неубедителна реакция на говеда, която обаче е равна или по-малка от положителна или неубедителна птича реакция и липсата на клинични признаци и в двата случая.
Животните, които не са реагирали сравнително на сравнителен интрадермален тест, се подлагат на допълнителен тест след най-малко 42 дни. Животните, които не реагират отрицателно на този втори тест, се считат за реагирали положително на теста.
2.2.5.3.3 Официално свободният от туберкулоза статут на стадото може да бъде спрян и животните от стадото нямат право да влизат в търговия в рамките на Общността, докато статутът на следните животни не бъде възстановен:
а) животни, за които се счита, че не реагират на обикновен интрадермален туберкулинов тест;
б) животни, за които се счита, че са положителни за обикновен интрадермален туберкулинов тест, но очакват повторно тестване под формата на сравнителен интрадермален тест;
в) животни, за които се счита, че не реагират на сравнителен интрадермален тест.
2.2.5.3.4 Когато законодателството на Общността изисква животните да преминат интрадермален тест преди движение, тестът трябва да се тълкува в смисъл, че върху животни не се поставя животно, показващо увеличение на кожната гънка над 2 mm или наличие на клинични признаци пазар в рамките на общността.
2.2.5.3.5 2.2.5.3.5. За да се позволи демонстрацията на максималния брой заразени и болни животни в стадо или регион, държавите-членки могат да модифицират критериите за тълкуване на теста, за да постигнат подобрена чувствителност към теста, всички неубедителни реакции, посочени в 2.2.5.3 .1 (а). б) и 2.2.5.3.2. писмо (б) се считат за положителни реакции.
3. ДОПЪЛНИТЕЛНО ИЗПИТВАНЕ
За да се позволи демонстрацията на максималния брой заразени и болни животни в стадо или регион, държавите-членки могат да разрешат използването на тест за гама-интерферон, даден в Ръководството на OIE за стандарти за диагностични тестове и ваксини, 4-то издание, 2000 г., Глава 2.3.3. (туберкулоза по говедата), в допълнение към туберкулиновия тест.
4. ДЪРЖАВНИ ИНСТИТУЦИИ И НАЦИОНАЛНИ РЕФЕРЕНТНИ ЛАБОРАТОРИИ
4.1 Роли и отговорности
Държавни институти и референтни лаборатории, включени в параграф 3.2. са отговорни за официалното тестване на туберкулините или реагентите, обхванати от параграфи 2 и 3, в техните собствени държави, за да се гарантира, че всеки от тези туберкулини или реагенти е адекватен по отношение на горните стандарти.
4.2 Списък на държавните институти и националните референтни лаборатории
Paul-Ehrlich Institut (PEI), Bundesamt für Sera und Impstoffe, D-23207 Langen; Bundesinstitut für gesundheitlichen Verbraucherschutz und Veterinärmedizin - Район Йена - D-07743 Йена;
Institut Scientifique de la Santé Publique - Луи Пастьор, 14 Rue Juliette Wytsman - B 1050 Брюксел - Белгия;
Национална лаборатория по ветеринарни лекарства, Fougères;
4. Велико херцогство Люксембург:
Институт на страната доставчик;
Висш санитарен институт, Рим;
Централен институт за контрол на животновъдството Lelystad (CIDC-Lelystad), Lelystad;
Danmarks Veterinærinstitut, Bülowsvej 27, DK-1790 Копенхаген;
Институт на страната доставчик;
9. Обединено кралство:
Агенция за ветеринарна лаборатория, Addlestone, Weybridge;
Kentro Kentinatri Kindramatonos, Неапол 25, 153 10 Ainea;
Лаборатория по санитария и животновъдство в Гранада;
Laboratorio Nacional de Investigação Veterinária, Лисабон;
Bundesanstalt für veterinärmedizinische Untersuchungen, Mödling;
Здраве и грижи за животните - laitos - Изследователски институти по ветеринарна медицина и храни, Хелзинки;
Statens veterinärmedicinska anstalt, Упсала.